鸡ES细胞体外定向诱导分化特性的研究

旨在探索鸡胚胎干细胞(ES细胞)体外定向诱导的多向分化潜能.分离鸡X期胚盘细胞,体外培养传代,经鉴定后,采用地塞米松(DEX)、β-甘油磷酸钠(β-GP)和维生素C(VitC)诱导ES细胞向成骨细胞分化;采用维甲酸(RA)、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)诱导ES细胞向神经元样细胞分化;采用DEX、胰岛素、IBMX诱导ES细胞向脂肪细胞分化,比较不同浓度组合诱导剂的诱导效果,分别用Von Kossa's染色法、甲苯胺蓝染色法、免疫组化法、油红O染色法和RT-PCR鉴定诱导产生的细胞.结果显示,ES细胞被诱导3～21 d后,分化为成骨细胞,诱导率为40％～72％;被诱导4～7 d后,分化为神经元样细胞,诱导率为71％～84％;被诱导2～21 d后,分化为脂肪细胞,油红O染色阳性,并表达PPARγ基因.结果表明,在体外条件下,ES细胞可被特异的化学物质定向诱导分化为成骨细胞、神经元样细胞和脂肪细胞,具有多向分化潜能.     

不同架式对设施葡萄生长发育和主芽坏死的影响

为了提高设施葡萄的产量与品质,通过不同的架式处理,研究其对设施"红提"葡萄枝蔓生长发育、果穗高度、主芽发育和果实品质的影响。结果表明,F形和L形架式显著的降低1 a生枝蔓的长度和粗度,降低了平均单果穗高度,显著提高了枝蔓花芽的形成率和主芽的萌芽率,与对照相比,F形和L形架式显著提高了葡萄的产量与品质。因此在宁夏设施环境下,合理的架式可缓和红提葡萄的生长势,调节主芽的坏死率和萌芽率,最终影响葡萄的产量与品质。     

紫叶稠李叶片离体培养再生植株

以紫叶稠李为试材,采用组织培养方法,研究不同激素对其试管苗不定芽诱导、不定芽生根及成苗影响。结果表明:叶片切块可诱导产生大量的不定芽,MS附加0.5mg/L BA和0.01mg/L NAA的培养基不定芽诱导率为50.1%;利用植物激素0.5mg/L BA,0.5mg/LNAA,0.5mg/L KT和0.2mg/L IBA的组合,不定芽可多次继代培养增殖;不定芽在附加0.4mg/L IBA的MS培养基上生根,生根率为67%。该试验结果说明,紫叶稠李试管苗叶片可作为外植体离体培养获得再生植株,BA是主要的调控植物激素,IBA对生根有一定促进作用。     

外源水杨酸对鸭梨叶片内源多胺含量的影响

以鸭梨为试材,研究了外源水杨酸对叶片内源多胺含量变化的影响.结果表明:不同浓度水杨酸处理对多胺含量变化的影响不同,低浓度的水杨酸处理在一定的时间内提高了叶片内源多胺的含量,而高浓度的水杨酸则抑制内源多胺的合成.在田间试验中,5月26日至7月26日腐胺和亚精胺含量显著提高,精胺含量无显著变化.     

南昆山莪术的组培快繁技术研究

以南昆山莪术的根状茎腋芽为外植体,采用MS基本培养基,附加不同种类、不同浓度的植物生长调节剂,进行了不定芽诱导、丛生芽继代、试管苗生根等研究,探索其组织培养和离体繁殖的适宜务件。结果表明:在MS+6-BA 5.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基中,不定芽的诱导率最高,达到85%;MS+TDZ 0.5 mg/L培养基最有利于丛生芽的增殖,增殖系数达到13.60;试管苗生根以1/2MS+NAA 0.2 mg/L培养基最好;当试管苗长至6 cm时出瓶移栽,成活率可达95%以上。     

宁夏三个葡萄品种高效再生体系的建立

以宁夏葡萄产业中大量种植的3个葡萄品种为试材建立再生体系.采用花药、茎尖进行愈伤组织诱导,比较了3种葡萄用花药、茎尖培养诱导愈伤组织形成、分化、生根的必须培养条件,获得不定芽分化再生植株.结果表明:葡萄花药愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很低,几乎不能分化成苗;而茎尖愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很高,分化成苗率极高,达100％.B5培养基诱导宁夏葡萄茎尖愈伤组织和分化丛生效果最好;KT有利于愈伤组织分化;茎尖浓度以0.8～1.0 cm最好.     

桃花芽休眠解除SSH文库构建及相关基因表达分析

 为了深入研究桃花芽休眠的分子机制,利用抑制差减杂交技术（SSH）,以解除休眠期的花芽的RNA为实验方Tester,以休眠期花芽的RNA为驱动方Driver,构建休眠解除cDNA文库,测定分析了180 个上调表达的cDNA 片段,测序成功128个,除去冗余序列,得到28个单一序列。对序列进行BLAST比对及功能注释,发现这些序列分别属于新陈代谢、氧化还原、信号转导、抗性相关等类别基因。运用qRT-PCR 技术对HisH3、Dhn 和Metallothionein基因进行检测,结果表明它们在花芽休眠解除过程中均上调表达。     

Construction of a lentiviral RNA interference vector targeting rat myocardin and its effect on vascular smooth muscle cell differentiation

AIM: To construct a lentiviral RNA interference(RNAi)vector targeting rat myocardin mRNA and to investigate its effect on the differentiation of vascular smooth muscle cells(VSMCs).METHODS: Three pairs of dsDNA targeting rat myocardin mRNA were designed, synthesized and cloned into lentiviral vector pGCSIL-GFP to generate pGCSIL-GFP-shMyocd lentvirus. A Flag-tagged myocardin-overexpression vector pEGFP-N1-Myocd was constructed with pEGFP-N1/X124G. After these two vectors were cotransfected into 293T cells, the flag protein was assessed by Western blotting to analyze the knockdown effect of pGCSIL-GFP-shMyocd. The expression of myocardin and SM22α was also detected by RT-PCR and Western blotting after the pGCSIL-GFP-shMyocd viruses were transfected into primary cultured rat aortal VSMCs.RESULTS: The rat myocardin lentviral RNAi vector pGCSIL-GFP-shMyocd and myocardin-overexpression vector pEGFP-N1-Myocd were successfully constructed. After these two kinds of vectors were cotransfected into 293T cells,the No.1 interfering vector displayed the highest inhibitory effect on flag expression.After the No.1 lentvirus at the titer of 1×10¹² TU/L was transfected into VSMCs, the myocardin and SM22α expression was significantly attenuated. CONCLUSION: The lentiviral pGCSIL-GFP-shMyocd RNAi vector is successfully constructed, which is useful for further study regarding the molecular mechanism of the phenotypic switching in VSMCs under special pathological conditions such as atherosclerosis. Inhibition of myocardin expression in VSMCs leads to the decrease in the expression of differentiation marker, and implies a crucial role of myocardin in VSMCs differentiation.     

白水江自然保护区植物果实类型组成及垂直分异

分析甘肃白水江国家级自然保护区1 943种野生被子植物果实类型组成及其沿海拔梯度的变化规律,结果表明:本区干果和肉果分别占65.67%和24.60%,在22种基本果实类型中,居前3位的分别为蒴果(26.56%)、瘦果(12.35%)和核果(12.20%);果实类型及其种数随海拔升高呈先增加后减少的趋势;随着海拔升高,干果比例上升,肉果比例下降并消失于3 800 m左右,其中蒴果比例在各海拔段均占据显著优势并呈上升趋势,瘦果和颖果比例先下降后上升,核果和浆果比例下降,梨果和翅果比例先上升后下降.聚类结果表明:海拔2 000m左右是基本果实类型种数分布的断点.果实类型垂直分异可能是伴随着相应海拔范围内水热条件及其组合特征的改变,以及果实传播方式的不同而产生的.在完善果实分类系统的前提下,可将果实类型的数量对比关系,作为反映某地区气候的生物标志之一.     

雷竹竹鞭侧芽分化过程中蛋白质和游离氨基酸的变化

雷竹竹鞭侧芽分化进程中,蛋白质和氨基酸总量,在侧芽分化前期和初期较多,而尚未分化和分化后期的侧芽均有减少;不同鞭龄的侧芽,蛋白质与氨基酸总量,以2～3年生竹鞭侧芽为多,随鞭龄发育成熟,这二类物质呈曲线相关;侧芽分化进程中,有16种氨基酸含量,以苏氨酸最多;蛋白质和氨基酸含量水平与侧芽分化数量相平行。